PRÁCTICA 9: TÉCNICA DEL TUBO INCLINADO

PRÁCTICA 9: TÉCNICA DEL TUBO INCLINADO (Tiempo protrombina)

OBJETIVO

Detectar la formación del coágulo de fibrina

FUNDAMENTO

Es una prueba cronométrica en la que se detecta visualmente la formación del coágulo de fibrina en el plasma de la muestra, estas pruebas deben de hacerse por duplicado y si las técnicas difieren en más del 10% la prueba se debe repetir. Los reactivos y el plasma se deben precalentar en un baño a 37ºC durante al menos 5 minutos, en el caso del reactivo solo se calienta la alicuota que se vaya a utilizar. En el momento que se añade al tubo de hemolisis con el plasma precalentado, el reactivo, se desencadena la coagulación y se pone en marcha el cronómetro. El plasma y el reactivo se deben mezclar inmediatamente, agitando el tubo de hemolisis de manera rápida y controlada 1-2 segundos, sin sacarlo del baño. A partir de este momento se realiza el movimiento de vivén, manteniendo el tubo dentro del agua para que no pierda temperatura. Todo el proceso del procedimiento ha de hacerse sin sacar apenas del baño la muestra. Y es conveniente que el baño esté bien iluminado bajo una lámpara de luz blanca.
El tubo con la mezcla se mantiene hasta que falten 3-4 segundos para el tiempo normal de coagulación.

MATERIAL 

-Muestra
-Reactivos
-Pipeta Pasteur
-Eppendorf
-Tubo de ensayo
-Baño a 37ºC
-Cronómetro

PROCEDIMIENTO 

1-Centrifugar a 2500-3000 rpm durante 10 minutos la muestra de sangre
2-Incubar 0,1 mL de plasma a 37ºC durante 2 minutos
3-Incubar 0'4 mL de reactivo durante 5 minutos a 37ºC
4-Pasados los tiempos de incubación añadir 0'2 mL de reactivo en el tubo de hemolisis y agitar para mezclar con el reactivo con el plasma. Iniciamos el cronómetro.
5- Seguido de esto movemos la muestra con un movimiento de vaivén, sin sacarlo del baño hasta que visualicemos el coágulo.

RESULTADOS 

Tiempo cronometrado hasta la formación del coágulo:
-Esther: 2,22'
-Sofía: 2,40' 
TP muestra/ TP control= 160s/ 118,80
TP= 1,34
Entra en los valores normales de protrombina.

OBSERVACIONES

TP plasma control= 118,80''
Tuvimos que repetir la prueba del control.

 Formación del coágulo


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