Quadern de pràctiques Sofía Silvestre

PRÁCTICA 9: TÉCNICA DEL TUBO INCLINADO (Tiempo protrombina) OBJETIVO Detectar la formación del coágulo de fibrina FUNDAMENTO Es una prueba cronométrica en la que se detecta visualmente la formación del coágulo de fibrina en el plasma de la muestra, estas pruebas deben de hacerse por duplicado y si las técnicas difieren en más del 10% la prueba se debe repetir. Los reactivos y el plasma se deben precalentar en un baño a 37ºC durante al menos 5 minutos, en el caso del reactivo solo se calienta la alicuota que se vaya a utilizar. En el momento que se añade al tubo de hemolisis con el plasma precalentado, el reactivo, se desencadena la coagulación y se pone en marcha el cronómetro. El plasma y el reactivo se deben mezclar inmediatamente, agitando el tubo de hemolisis de manera rápida y controlada 1-2 segundos, sin sacarlo del baño. A partir de este momento se realiza el movimiento de vivén, manteniendo el tubo dentro del agua para que no pierda temperatura. Todo el proceso del procedimient...

 PRÁCTICA 7                                            PARTE 1:                                                                    11/01/22 CUANTIFICACIÓN DE HEMOGLOBINA A2 OBJETIVOS Obtener la concentración de hemoglobina A2 de una muestra. FUNDAMENTO Ya preparado el hemolizado, las hemoglobinas quedarán retenidas en la resina de la columna por intercambio iónico. La hemoglobina A2 se eluye de forma específica bajo estrictas condiciones de pH y fuerza iónica, después cuantificaremos en el espectrofotómetro por lectura a 415nm. MATERIALES -Reactivo -Columnas -Sangre anticoagulada -Micropipetas -Pipetas -Puntas de pipeta -Tubos de ensayo -Vaso de precipitados -Eppendorf -Cubetas de espectrofotómetro PROCEDIM...

PRACTICA 8 RETRACCIÓN DEL COÁGULO OBJETIVO Obtener la cantidad de suero producida en la retracción del coágulo. FUNDAMENTO La prueba es una valoración de la hemostasia primaria, dando resultados anómalos alertando sobre una alteración pero sin especificar la causa. La retracción del coágulo ofrece información indirecta relativa a la cantidad de plaquetas y a su función como la que es la retracción del coágulo. Este fenómeno se produce al final del proceso de la formación del coágulo sanguíneo, debido a la contracción de las fibras de trombostenina intraplaquetarias. La cantidad de suero producida está en relación con el grado de retracción del coágulo. MATERIALES -Eppendorf -Sangre  -Pipeta PROCEDIMIENTO 1- Introducir 1mL de sangre en Eppendorf y colocarlo en un baño a 37ºC durante una hora. 2-Transcurrido el periodo de incubación, medir la distancia desde la base del tubo hasta el menisco superior de la sangre coagulada. 3- Retirar con cuidado el coágulo con un palillo fino o alam...

  PRÁCTICA 6  PARTE 1: DETERMINACIÓN DEL HEMATOCRITO OBJETIVO Sedimentar los hematíes de un volumen sanguíneo determinado y así medir el volumen que ocupan. FUNDAMENTO La determinación del hematocrito se basa en sedimentar los hematíes de un volumen sanguíneo determinado mediante la fuerza centrífuga y finalmente medir el volumen que ocupan. Los procedimientos para realizar esta determinación son el macrohematocrito (se utiliza un volumen de sangre mayor) y el microhematocrito (con menor volumen de sangre). Nosotros utilizaremos el microhematocrito para la medición. MATERIAL -Sangre anticoagulada - Capilares 75mm  -Centrífuga para microhematocrito -Regla graduada o lector de hematocrito -Plastilina PROCEDIMIENTO 1- Preparamos el material 2- Introducimos los capilares de forma ligeramente inclinada en la boca del tubo de sangre anticoagulada, sin llenarlos enteros, 3/4 de su longitud aproximadamente. 3-Sellamos con plastilina el extremo por el que se ha llenado y se centri...

 PRÁCTICA 5  RECUENTO DE LEUCOCITOS PARTE 1: FÓRMULA LEUCOCITARIA MANUAL OBJETIVO Realizar una fórmula leucocitaria a partir de nuestras muestras de extensión sanguínea. FUNDAMENTO La fórmula leucocitaria consiste en el recuento diferencial de los distintos tipos de leucocitos presentes en la sangre: eosinófilos, basófilos, neutrófilos, linfocitos y monocitos. Esto se obtiene mediante el estudio microscópico con el objetivo de 100x de nuestras extensiones previas y teñidas con May Grünwald-Giemsa o panóptica rápida, se cuenta un total de 100 leucocitos y se calcula el porcentaje de cada tipo celular observado e identificado, incluyendo formas inmaduras y blastos. MATERIAL -Extensiones previas teñidas -Aceite de inmersión -Microscopio PROCEDIMIENTO 1-Visualizamos nuestra extensión en el microscopio. 2-Empezamos de menor a mayor aumento hasta llegar al 100x. 3-Con aceite de inmersión nos situamos alrededor del cuerpo de la extensión. 4-Haciendo una visualización en forma de S va...

PRÁCTICA 4 RECUENTO DE HEMATÍES CON CÁMARA DE NEUBAUER OBJETIVO Realizar un recuento manual de hematíes con la cámara de Neubauer. FUNDAMENTO La cámara de Neubauer es un portaobjetos especial de vidrio, de cierto grosor, dos surcos laterales y uno central dividen en el centro del portaobjetos las dos cámaras de recuento, tienen grabadas una cuadrícula que consiste en un cuadrado 3x3 mm con subdivisiones internas en cuadrados más pequeños. El cubrecámara queda por encima de las cuadrículas y el recuento se efectúa en el cuadrado primario central, dividido en 16 y cada cuadrado de la cuadrícula está dividido en 16 cuadrados más pequeños. Se cuentan cinco cuadrados, las cuatro esquinas y uno central. MATERIALES -Muestra  -Reactivo Hayem -Micropipeta -Cámara -Cubrecámara -Pipeta PROCEDIMIENTO 1-Calculamos el volumen de sangre para la dilución isotónica (Hayem). Vi: 5 microlitros. 2-Realizamos una dilución 1/200, 5 microlitros de sangre de la muestra y 995 microlitros del líquido Hayem....