PRÁCTICA 4

PRÁCTICA 4

RECUENTO DE HEMATÍES CON CÁMARA DE NEUBAUER

OBJETIVO
Realizar un recuento manual de hematíes con la cámara de Neubauer.

FUNDAMENTO
La cámara de Neubauer es un portaobjetos especial de vidrio, de cierto grosor, dos surcos laterales y uno central dividen en el centro del portaobjetos las dos cámaras de recuento, tienen grabadas una cuadrícula que consiste en un cuadrado 3x3 mm con subdivisiones internas en cuadrados más pequeños. El cubrecámara queda por encima de las cuadrículas y el recuento se efectúa en el cuadrado primario central, dividido en 16 y cada cuadrado de la cuadrícula está dividido en 16 cuadrados más pequeños. Se cuentan cinco cuadrados, las cuatro esquinas y uno central.

MATERIALES
-Muestra 
-Reactivo Hayem
-Micropipeta
-Cámara
-Cubrecámara
-Pipeta

PROCEDIMIENTO
1-Calculamos el volumen de sangre para la dilución isotónica (Hayem). Vi: 5 microlitros.
2-Realizamos una dilución 1/200, 5 microlitros de sangre de la muestra y 995 microlitros del líquido Hayem.
3-Se carga la cámara con el cubrecámara encima, depositando una gota de la dilución en un extremo de la franja central, por capilaridad difundirá.
4-Dejamos reposar para que las células sedimenten.
5-Se realiza el recuento en el microscopio por cuadrados.

RESULTADOS

 
Así es como se observa una muestra en la cámara de Neubauer, contando los hematíes de cada cuadrado.

Número de hematíes por cuadrado (5):
1º- 14 hematíes
2º- 6 hematíes
3º- 36 hematíes 
4º- 17 hematíes
5º- 34 hematíes
Suma total de 107 hematíes.

Sustituimos en la regla de tres para obtener los hematíes por cada mm2 de la cámara(es decir, por cada agrupación de 16 cuadrados grandes).

nº de hematíes (en los 5 cuadrados pequeños de uno central) / 80 (16 cuadrados pequeños x5 cuadrados)------- 0,00025mm3 (volumen de un cuadrado grande)
X------- 1mm3 (cuadrado de 16 grandes)

X: (107/80) x 1/ 0,00025= 5.350 hematíes 

OBSERVACIONES
El recuento debe incluir todas las células depositadas en el interior del cuadrado grande, incluyendo las que estén en contacto con dos líneas adyacentes de las cuatro que delimitan el cuadrado.

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